安源路矿工人身受沉重的阶级压迫和剥削，反抗情绪激烈。工人俱乐部的成立和宣传教育工作的开展，促使他们迅速团结和觉醒，以罢工争取经济利益和政治权利的呼声日益高涨。1922年7月，汉阳铁厂工人大罢工，挫败了军阀当局以武力强行解散工人俱乐部的企图。消息传来，鼓舞了安源工人群众，加速了安源大罢工爆发的进程。路矿当局也害怕汉阳罢工风潮席卷安源，便以工人俱乐部是所谓“乱党机关”为由，呈请萍乡县署和赣西镇守使署下令查封。这就激化了双方的矛盾冲突，直接引爆了安源大罢工。

1922年9月初，毛泽东第三次来到安源巡视工作。他连夜召开安源党支部会议，在听取情况汇报后，指出罢工的时机已经成熟，要使路矿当局屈服，非进行罢工不可，并要求支部从各方面加紧准备。9月11日，工人俱乐部向路矿当局提出三项最低要求：路矿当局必须“陈情行政官厅，明白出示保护俱乐部”，每月津贴俱乐部经费大洋200元，发还拖欠工人的工资。以上要求限两日以内答复，如不圆满解决，立即罢工。同时，向全国发出快邮急电，呼吁声援。9月13日，安源路矿工人罢工指挥部成立，李立三任总指挥，刘少奇任工人俱乐部全权代表。

9月14日凌晨，在得不到路矿当局有诚意的答复之后，李立三义无反顾地下达了罢工令。朱少连等人迅速登上火车机车，拉响了宣告安源大罢工的汽笛，顿时全路矿陷于瘫痪。当天下午，工人俱乐部向社会各界发表《罢工宣言》。“从前是牛马，今天要做人”的口号，从万余工人的心胸中一齐发出，惊天地，泣鬼神，全国为之震撼，各地声援信函、电报纷纷传来。

安源大罢工爆发之时，路矿当局即以所谓“乱党作乱”为借口，花钱请赣西军阀李鸿程出兵安源，进行军事戒严，并包围工人俱乐部。他们企图造成一种大军压境的恐怖气氛，借此威慑人心，迫使罢工群众屈服，无条件地迅速复工。李立三、刘少奇坚持以党支部为核心、俱乐部会员为骨干，将路矿13000多工人团结起来，形成一呼百应、众志成城的战斗集体，坚持罢工到底。路矿当局在武力胁迫不能奏效时，提出要和工人俱乐部代表谈判。9月15日，李立三前往谈判，提出了复工的17项条件，其中包括承认工人俱乐部的合法地位、改善工人的生活待遇以及增加工资等。路矿当局要求工人俱乐部先下令复工再商议条件，遭到李立三断然拒绝。

李立三、刘少奇领导安源大罢工，既坚持原则，又采取“文明罢工”的斗争策略，和安源路矿资本家以及地方军政当局进行有理有利有节的抗争。工人纠察队不仅维护矿区和街市的社会秩序，还保护锅炉房、发电机和水泵等要害设备，使它们能够正常运转。全体路矿工人在罢工期间人心稳定，听从号令，秩序井然。安源工人如此文明的罢工，促使形势很快发生重大变化。当地社会各界和士兵对罢工的工人均表示理解和同情。

9月17日，路矿当局与工人代表李立三再次谈判。双方最终达成复工的13项条件，其中包括承认工人俱乐部有代表工人之权并允诺增加工资、改善待遇等，并于18日上午正式签字。当天下午，13000多路矿工人欢聚在大操场，隆重举行庆祝罢工胜利大会。刘少奇登台演讲，李立三宣读复工13项协议，全场工人一齐脱帽欢呼：“工人万岁!”“俱乐部万岁!”大会发布了《萍乡安源路矿工人上工宣言》。当天晚上，路矿工人全体复工。

安源大罢工是在中共领导下取得胜利的江西第一次工人运动，既争取到了路矿全体工人的眼前利益，又代表了工人阶级的长远利益。罢工历时5天，“秩序良好，组织极严，工友很能服从命令，俱乐部共用费计一百二十余元，未伤一人，未败一事，而得到完全胜利”。因此，可以说安源大罢工在幼年时期的中国工人运动中，创造了绝无仅有的成功范例。